在本季中，Tim Speedle离开了，而新人Ryan Wolfe则加入了小组。
Horatio Caine：David Caruso饰演，是迈阿密达德郡犯罪实验室的组长，曾经是拆弹小组的警官，现在是监识分析师。
Calleigh Duquesne：Emily Procter演，弹道科学家，出生于路易西安那州达尼尔（Darnell），西班牙语十分流利，曾在图兰大学（Tulane University）获得物理学学士学位。
Eric Delko：Adam Rodriguez饰演，指纹与药品辨识专家，土生土长于迈阿密，曾在迈阿密大学获得化学学士学位。父亲俄罗斯人，母亲古巴人，所以西班牙语和俄语都很流利。当情况需要时，达可在小组里通常是扮演蛙人的角色。
Alexx Woods：Khandi Alexander饰演，迈阿密达德郡的验尸官。她有一个古怪的习惯就是在验尸的时候跟尸体讲话，通常是想要让死者死后可以更为安详。
Ryan Wolfe：Jonathan Togo饰演，是一个想进入真实鑑识工作的基层巡逻员警。他了解到自己永远无法取代史毕的地位，只能尽力地成为小组的一员。沃夫首次出现在“Under the Influence”这一集，不过直到“Hell Night”这一集之后才变成常态演出。
Yelena Salas：Sofia Milos饰演，一个常常跟CSI一起调查的重案组探员，也是何瑞修弟弟雷蒙的遗孀。
本剧衍生自《犯罪现场调查第十三季》。
